运河支队抗日纪念馆，是目前国内惟一一座全面反映苏鲁边界运河支队八年抗战史实的大型专题纪念馆，是徐州市爱国主义教育基地、徐州市文化产业示范基地，集宣教、收藏、研究、旅游多功能于一体。本馆坐落于徐州市贾汪区境内的卧龙泉生态度假园，这里曾是运河支队与日军浴血战斗的地方。整个纪念馆包括大厅部分和七个展厅。
大厅是整个纪念馆的序曲，展出的内容有两大部分。第一部分是镌刻在大厅北面墙上《运河支队大事记》，它记载了运河支队的光辉历史和丰功伟绩。大厅的第二部分，在不同的历史时期，是党和国家领导人对运河支队的亲切关怀和高度评价（分布在大厅左右两侧）。
七个展厅分别是《运河支队的组建和发展历程》、《敢于在鬼子头上跳舞》、《秘密交通线上的忠诚卫士》、《运河支队坚持统一战线》、《人民支持和根据地建设》、《抗日烈士永垂不朽》、《运河支队军魂永存》。